Orvosi Hetilap, 1983. május (124. évfolyam, 18-22. szám)
1983-05-15 / 20. szám - EREDETI KÖZLEMÉNYEK - Láng István - Shao-Hsien Chen - Lydyard, Peter: Cyclosporin A hatása emberi limfociták antitest-dependens és természetes citotoxicitására
EREDETI KÖZLEMÉNYEK LÁNG ISTVÁN DR. CHEN SHAO-HSIEN DR. ÉS PETER LUDYARD DR. Cyclosporin A hatása emberi limfociták antitest-dependens és természetes citotoxicitására Semmelweis Orvostudományi Egyetem II. Belgyógyászati Klinika (igazgató: Petrányi Gyula dr.) Londoni Egyetem Middlesex Hospital Medical School, Immunológiai Tanszék (igazgató: Ivan M. Roitt dr.) A Cyclosporin A (CyA) elsősorban a T sejteket gátló, nagy hatású újabb immunoszupresszív gyógyszer. Vizsgálatainkban 0,1—10,0 ng/ml koncentrációban sem a célsejtekkel és az effektorsejtekkel együttinkubálva, sem az effektorsejtekkel előinkubálva nem csökkentette egészséges emberi limfociták antitest-dependens (ADCC) és természetes (NK) citotoxicitását. A Polimnozinát-Policitidilát (Poli-IC) által indukált NK aktivitás fokozódást viszont már 1,0 /rg/ml koncentrációban szignifikánsan gátolta. A hatásmechanizmus vagy a Poli-IC által indukált és/vagy aktivált NK sejtek direkt gátlása, vagy az interferon felszabadulás csökkentése lehet. A Cyclosporin A (CyA)1 erősen immunoszuppresszív hatású gomba anyagcseretermék (23). Elsősorban a T sejtek működését gátolja (1, 6). Hatását feltehetőleg a limfocita differenciálódás korai stádiumában fejti ki (24). Az eddigi klinikai vizsgálatok szerint sikerrel alkalmazható a transzplantátum-kilökődés (4) és a graft versus host reakció (20, 21) gátlására. Kipróbálás alatt áll SLE-ben is (12). Mint erősen immunoszuppresszív gyógyszer, a betegek daganatellenes immunreakcióját is csökkentheti. Ezzel függhet össze, hogy CyA-val kezelt vese recipiensek között gyakoribbak a limfoid rendszer tumorai (4). Mivel az antitest-dependens (ADCC, 16) és természetes (NK, 18) sejtes citotoxicitás daganatellenes hatását többen feltételezik (7, 17, 22), megvizsgálták, hogy befolyásolja-e a CyA in vitro az emberi limfociták ADCC és NK aktivitását. Rövidítések: CyA: Cyclosporin A ADCC: antitest-dependens celluláris citotoxicitás NK: természetes killer Poli-IC: Poliinozilát-policitidilát Orvosi Hetilap 1983. 124. évfolyam, 20. szám 3' Cyclosporin A effect on the antibody-dependent and natural cytotoxicity of human lymphocytes. Cyclosporin A (CyA) is a new and effective immunosuppressive drug inhibiting chiefly T cells. Incubating with target cells and effector cells or preincubating with effector cells in a concentration of 0,1—10,0 /rg/ml it decreased, however, neither the antibody-dependent (ADCC) nor the natural (NK) cytotoxicity of healthy human lymphocytes. At the same time it significantly inhibited the increase of NK activity already in a concentration of 1,0 //g/ml induced by Polynosinate-Polycytidylate (Poly-IC). Its potency can be explained either by the direct inhibition of the NK cells induced and/or activated by Poly-IC or by the decreased release of interferon. Anyag és módszer Az effektorsejtek szeparálása A perifériás vér mononukleáris sejtjeit egészséges véradók defibrinált véréből szeparáltuk Begum módszerével (2). A fagocitáló sejteket vasporos-mágneses kezeléssel távolították el. A monociták aránya nem érte el az 1%-ot (latex fagocitózis, Don Latex, Serva). A sejtek életképessége akridinorange-etidiumbromid festéssel (15) vizsgálva 90% fölötti volt. Cyclosporin A (CyA) A CyA-t J. Boréi dr. (Sandoz, Basel, Svájc) bocsátotta rendelkezésünkre, szívességét ezúton is köszönjük. A gyógyszert az in vitro kísérletekhez frissen oldottuk 0,1%-os végkoncentrációjú etanolban. Az ADCC és NK aktivitásra gyakorolt hatását 0,01—10,0 pg/ml koncentráció tartományban vizsgáltuk. Ez magába foglalja a 0,1—0,5 gg/ml körüli terápiás vérszintet is (idézve: 11). A 0,01, 0,1, 1,0 és 10,0xg/ml-es CyA végkoncentrációkat 10% borjúsavat tartalmazó RPMI 1640 tápfolyadékkal állították be. Előzetesen megállapítottuk, hogy az oldószerként használt etanol sem az effektorsejteket (akridinorange-etidiumbromid festés, 15), sem a célsejteket (változatlan spontán izotópfelszabadulás) nem károsította. A kísérletek egy részében az effektorsejteket 18 órán át inkubáltuk CyA-val, majd a gyógyszert tápfolyadékkal kimostuk („előinkubálás”), más részében pedig a CyA-t a célsejtek és az effektorsejtek összemérésekor adtuk a tesztrendszerhez („együttinkubálás”).% 1181