Magyar Nőorvosok Lapja, 2000 (63. évfolyam, 1-6. szám)

2000 / 2. szám - BAKTERIOLÓGIA - Dósa Erika - Urbán Edit - Földes Márta - Török László - Kalmár László - Nagy Erzsébet: Az Affirm VPIII DNA hibridizációs teszt alkalmazása a női urogenitális traktus kórokozóinak vizsgálatában

Magyar Nőorvosok Lapja 63 (2) 2000. bően, automatikusan reagáltatja, 32 perc 34 mp alatt. A műszer egyidejűleg hat minta vizsgálatára alkalmas. A pozitív eredményt a golyócskák kék színűre változása jelöli (2. ábra). A teszt érzékenységét úgy alakították ki, hogy nega­tív eredményt kapunk, ha kórokozók csíraszáma ala­csonyabb a mintavevő tamponon, mint a2x105 G. vaginalis, a1x101 Candida sp., 1 5x105 T. vaginalis esetében. Pozitív eredmény várható, ha a vizsgálati anyagmintában a kórokozók csíraszáma eléri, vagy ma­gasabb a fenti csíraszámnál. A kit által megadott pozi­­tivitás határértékeket saját vizsgálatainkkal is kontrol­láltuk. Bakteriális vaginózis pozitív kontrolljaként egy bakteriális vaginózis tüneteire utaló asszony hüvelyvá­ladékának általunk előzetesen kitenyésztett vegyes anaerob tenyészetét alkalmazták. A hüvelyváladékból az anaerob tenyésztés során G. vaginalis és vegyes anaerob flóra (Mobilluncus sp. Prevotella sp., Bacteroides sp., I. táblázat 196 hüvelyváladék összehasonlító vizsgálatának eredményei Porphyromonas sp. Peptostreptococcus sp.) tenyész­tett. Az agar lemez felületén a fenti kórokozók 105 csíraszámban tenyésztek. Az Affirm VPIII teszttel a minta erős pozitivitást mutatott. A Candida sp. kont­rollálására C. albicans ATCC 14053 törzs 104/ml te­nyészetét alkalmazták. Az Affirm VPIII teszttel a min­ta erős pozitivitást mutatott. A 107 ml élőcsíraszámú T. vaginalis tenyészet 100p-nyi mennyiségével átita­tott tamponos mintája, amely a T. vaginalis 100 csíra­számát jelenti tamponon, az Affirm VPIII teszttel pozi­tív eredményt adott. Eredmények Az I. táblázatban láthatóak a kenetvizsgálat, a tenyésztés és a DNS hibridizációs teszttel kapott eredmények. A teszt a bakteriális vaginózis diagnosztikáját elsősorban a G. vaginalis jelenlétére alapozza. A bakteriális vaginózis kórképre - a vegyes anaerob flóra - a jellemző: Mobillincus sp., Prevotella sp., Bacteroides sp., Porphyromonas sp., Peptoszeptococcus sp., Mycoplasma hominis törzsek magas csíraszámú együttes jelenléte a G. vaginalis mellett. Vizsgálataink során 31 esetben az anaerob te­nyésztés és az Affirm teszt BV is pozitív ered­ményt adott. A minta az Affirm teszttel gyengén pozitívnak bizonyult G. vaginalis-ra. Ebben a két esetben az anaerob tenyésztés során G. vaginalis nem tenyészett azonban nagy csíraszámban egyéb anaerob kórokozó: Mobilluncus sp., Prevotella melaninogenica, Bacteroides fragilis, Pepto­streptococcus micros került identifikálására. Ezekben az esetekben a gyenge pozitivitás oka le­het, hogy az Affirm VPIII a M. mulieris 4x107 ml és a Bifidobacterium dentium 8x107ml csíra­száma esetén egy nem specifikus G. vaginalis po­zitív eredményt ad. (BBL kit tájékoztató) Az Affirm VPIII Candida sp pozitív eredmé­nyeket a Sabouraud-agar lemezen történt tenyész­tés mind a 22 esetben igazolta. A Gram­ szerint festett kenetben csak 20 esetben voltak sarjadzó gomba elemek láthatók. Az Affirm VPIII Candida sp. keresztreakció révén pozitív eredményt mutat a Cryptococcus neoformans 1x107ml csíraszáma esetén. A Cryp­tococcus neoformans előfordulása vulvoginitis­­ben elenyésző, vizsgálati anyagmintáinkból nem izoláltuk ezt a kórokozót. Vizsgálataink során az Affirm VPIII teszttel 10 esetben kaptunk Trichomonas vaginalis pozitív eredményt, míg tenyésztéssel 12 alkalommal. Ezt az egyezési arányt magyarázhatja a kontrollként elvégzett, korábban említett vizsgálat eredménye. + A/0I1,imi_14 v \SJ \ */ SZÍNEZŐ Яг' SZÍNTELEN CÉLSZEKVENCIA MIKROPARTIKULÁHOZ KÖTÖTT KOMPLEMENTER SZEKVENCIA SZÍNEZŐ RÉSZECSKE KÉK POZITÍV SZÍNEZŐ RÉSZECSKÉK EREDMÉNY SZUUSZIUÁI M Jw KÖTŐDÉSE A HIBRIDHEZ ENZIM KONJUGÁTUM 7. ábra A DNS hibiridzáción alapuló teszt elve о о ^ Trichomonas ® Gardnentta I'M­' Candida Qja/f«chr .О V 2. ábra Gardienella vaginalis és Candida sp. pozitív gén próba eredeti „РАС" card-ja Pozitív esetek száma Affirm VPIII Gram kenet Tenyésztés Bakteriális vaginózis 31 31 29 Candida sp. 22 20 22 Trichomonas vaginalis 10 12 BV+Candida sp. 7 7 7

Next