Hidrológiai Közlöny 2009 (89. évfolyam)
6. szám - L. Hidrológiai Napok: "A hazai hidrobiológia ötven éve" Tihany, 2008. október 1-3.
154. HIDROLÓGIAI KÖZLÖNY 2009. 89. ÉVF. 6. SZ. bet, szulfid-koncentráció) származhat. A szezonális változásokat a termálkútból származó minták faj összetételében is nyomon követhetjük. A júniusi és augusztusi minták közösségei ebben az esetben is nagyobb hasonlóságot mutattak egymással, mint a tavaszi mintával. A megfigyelt változások a vizek szulfidkoncentrációjának időszakos ingadozása-1. táblázat. Harkányfürdőgyógyvíz-kútjainak vízmintáiból nyert A 2006. novemberi büdöstapolcai kompozit mintából (BTK 2006 11), a 2007. áprilisi mintavételből származó BT1 és BT2 mintákból (BT1 2007 04, BT2 2007 04), valamint a 2008. áprilisában vett termálkút mintából (HT 2008 04) származó 16S rDNS klónkönyvtárak feldolgozása során összesen 269 klónból 144-et csoportosítottunk ARDRA segítségével, majd elvégeztük a csoport-reprezentánsok szekvencia analízisét. A négy klónkönyvtár elemzése során 16 különböző baktérium taxont sikerült azonosítanunk (1. táblázat). Az őszi és a tavaszi idényben vizsgált három büdöstapolcai mintában az Epszilon-proteobaktériumok csoportjába tartozó klónok, továbbá a Delta-proteobaktériumok Desulfocapsa, a gamma-proteobaktériumok Thiothrix és a Bétaproteobaktériumok Thiobacillus nemzetségének tagjai voltak jelen állandó közösségalkotóként. A legtöbb általunk vizsgált klónszekvencia (65 klón) az Epszilon-proteobaktériumok csoportjába tartozó eddig tenyésztésbe még nem vont környezeti klónokkal mutatta a legnagyobb mértékű szekvencia illeszkedést. Emellett a Delta-proteobaktériumok csoportjába tartozó Desulfocapsa sulfexigenst képviselő klónok jelentek meg nagyobb arányban (36 klón). A szulfát redukáló Desulfocapsa nemzetség tagjai mezofil szervezetek (optimális hőmérsékletük 30°C) elemi kén, szulfit vagy tioszulfát jelenlétében kemoautotróf módon növekednek (Finster és mtsai, 1998). A Gamma-proteobaktériumok csoportjába tartozó, aerob hemolitotróf anyagcseréjű, szulfid-oxidáló fonalas szerveződésű Thiothrix rnzii baktériumfajt reprezentáló klónok a két idényben szintén jelen voltak (3 klón). Jelenlétük a szulfidos termálvizeken kívül gyakran megfigyelhető szennyvíztelepek eleveniszapos medencéiben, tengeri üledékekben (Moissi és mtsai, 2002). Szénforrásként a vízben oldott CO2-t és HCO3-t használják fel. A szén beépüléséhez szükséges energiát elsősorban a vízben lévő oldott szulfidnak az oxidálásával nyerik. A szulfid oxidálása során vízben oldhatatlan elemi kén keletkezik. A két őszi és két tavaszi klónnal reprezentált Thiobacillus fajok aerob, kemolitotróf kénoxidáló baktériumok (Engel és mtsai, 2004) val és a tavaszi maximum koncentrációkkal hozhatók összefüggésbe, amiből arra következtethetünk, hogy az oldott kénformák koncentrációjának kismértékű változása is jelentős hatással van a kénbaktérium-közösségek dominancia viszonyaira. 16S rDNS klánok relatív gyakorisága és filogenetikai rokonsága A büdöstapolcai mintákból származó baktériumközösségekben kisebb gyakoriságban további kénbaktériumokkal rokon klónszekvenciákat találtunk. Ezek a szintén fonalas szulfid-oxidáló aerob Thiothrix fructosivorans kénbaktériummal, a fakultatív anaerob, kemolitotróf kén-oxidáló Sulfuricurvum kujiense baktériummal (Kodama és mtsai, 2004), a kén- és tioszulfát-oxidáló kemolitotróf Sulfurorum nemzetség tagjaival (Inagaki és mtsai, 2004) és az anaerob szulfát-redukáló kemolito-heterotróf Desulfopila aestuarii baktériummal (Suzuki és mtsai, 2007) mutattak legnagyobb szekvencia hasonlóságot. Ezen kívül kis számban jelen voltak az aerob, obligát kemolitotróf Thiovirga sulfuroxydans baktériumot (Tsukasa és mtsai, 2005), az aerob kemolitoheterotróf tioszulfát-oxidáló Limnobacter thiooxydans baktériumot (Spring és mtsai, 2001), valamint a fotoautotróf Rhodobacter vinaykumaraii bíbor nem kénbaktériumot képviselő klónok. A termálkút baktériumközösségében két klón a Sulfurihydrogenibium nemzetség tagjaival mutatta a legnagyobb szekvencia hasonlóságot. A nemzetségbe tartozó termofil szulfid-oxidáló kénbaktériumokat 72-80°C-os japán szulfidos hőforrásokból írták le (Nakagawa és mtsai, 2003). Emellett a Béta-proteobaktériumok csoportjába tartozó fakultatív aerob, szulfid-oxidáló Thiomonas nemzetség képviselőit (Chen és mtsai, 2004) sikerült a termálkútból azonosítanunk. Összefoglalás Munkánk során főként speciális környezeti feltételekhez alkalmazkodott mező- és termofil, kemolitotróf baktériumok jelenlétére mutattunk rá, melyek a gyógyvizek kén körforgalmában - így a szulfid koncentráció szabályozásában - is szerepet játszhatnak a szulfid-kén oxidációs, valamint a szulfát-kén redukciós anyagcsere folyamataik révén. A DGGE vizsgálatok eredményei által nemcsak a mintavételi területek közti különbségre, hanem az egyes baktériumközösségek szezonális változásaira is fény derült. Filogenetikai csoport Legközelebbi rokon taxon BTK 2006 11 BT1 2007 04 BT2 2007 04 T6 2008 04 Epszilon-proteobaktériumok Tenyésztésbe nem vont klónszekvencia 30 33 2 -Sulfuricurvum kuijiense (AB080645)3 1 -Sulfurorum sp. --3 -Delta-proteobaktériumok Desulfocapsa sulfexigens (Y13672) 33 -3 -Trichlorobacter thiogenes (AF223382) 4 ---Desulfopila aestuarii (AB110542) --2 -Gamma-proteobaktériumok Thiothrix fructosivorans (L79962) 5 ---Thiovirga sulfuroxydans (AB118236) 4 ---Thiothrix unzii (L79961) 2 -1 -Béta-proteobaktériumok Limnobacter thiooxidans (AJ289885) -1 --Thiobacillus sp. 2 2 --Methyloversatilis universalis(DQ923115) -5 2 -Thiomonas sp. ---2 Alfa-proteobaktériumok Rhodobacter vinaykumarai (AM600642) -1 --Hydrogenothermaceae Sulfurihydrogenibium sp. ---2 Acidobacteria Geothrix fermentans (A41563) -1 --Összes klónok száma 80 46 144